DNA संश्लेषण को आधारभूत सिद्धान्त

रासायनिक DNA संश्लेषण ठोस चरण संश्लेषण रणनीति र phosphoramidite रसायन विज्ञान मा आधारित छ।जैविक DNA संश्लेषण भन्दा फरक, रासायनिक DNA संश्लेषणमा सामग्री DMT (4, 4-dimethoxytrityl) र phosphoramidite परिमार्जित deoxyriboxyside, चित्र 1 मा देखाइएको छ। DNA संश्लेषण ठोस समर्थन मा गरिन्छ (हामी विभिन्न प्रस्ताव गर्न सक्छौं।ओलिगो संश्लेषण स्तम्भ), अर्थात् CPG (नियन्त्रित पोर ग्लास) र PS (पोलिस्टिरिन), र सम्पूर्ण संश्लेषण एक मा प्रदर्शन गरिन्छ।DNA/RNA सिंथेसाइजर, जुन हाम्रो मुख्य उपकरण हो, यसको विभिन्न मोडेलहरू छन् जस्तै: HY सिंगल च्यानल सिन्थेसाइजर, HY-12, HY-192 र आदि, संश्लेषण दिशा 3' देखि 5' सम्म हुन्छ, र एक मार्फत ठोस समर्थनमा न्यूक्लियोटाइड परिचय गरिन्छ। संश्लेषण चक्र।सामान्यतया संश्लेषण चक्रले चार चरणहरू समावेश गर्दछ, डिप्रोटेक्शन, युग्मन, क्यापिङ र ओक्सीकरण (चित्र 2)।डिप्रोटेक्शनलाई ठोस समर्थनमा DMT समूह वा अघिल्लो न्यूक्लियोसाइडमा 5' हाइड्रोक्सिल समूह हटाउन सेट गरिएको छ, डिक्लोरोमेथेनमा 3% ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड डिप्रोटेक्शन अभिकर्मकको रूपमा प्रयोग गरिन्छ।त्यसपछि फास्फोरामिडाइट परिमार्जित डिओक्साइरिबोक्साइडलाई एक्टिभेटरको सहयोगमा हाइड्रोक्सिल समूहलाई एक्सपोजर गर्न अनुमति दिइयो, अर्थात् 5-इथिलथियोटेट्राजोल वा 4, 5-डाइस्यानोइमिडाजोल, फोस्फाइटेट्रिस्टर (III) को गठन, र युग्मन चरण महसुस भयो।एक क्यापिङ चरण युग्मन चरणको समयमा प्रतिक्रिया नगरिएको हाइड्रोक्सिल समूहलाई अवरुद्ध गर्न, अवांछित दोष अनुक्रमहरूको गठनलाई कम गर्नको लागि गरिन्छ।अन्तमा, अस्थिर फास्फिटेट्रिस्टर (III) लाई रासायनिक स्थिर फास्फोर्ट्रिस्टर (V) मा अक्सिडाइज गरिएको छ जसमा आयोडिन पाइरिडिनमा अक्सिडेन्टको रूपमा हुन्छ।

संश्लेषित डीएनए एमिनोलाइसिस द्वारा ठोस समर्थनबाट क्लीभेज हुन सक्छ, फस्फोर्ट्रिस्टरमा 2-सायनोइथिल संरक्षित समूह र न्यूक्लियोबेसमा एमाइड एकै समयमा क्लीभेज हुन्छ, रैकमा सिन्थेसिस प्लेटहरू र सिन्थेसिस स्तम्भहरू सीधा प्रतिक्रिया कक्षमा राखिन्छन्। कोसंरक्षण उपकरण।कच्चा डीएनए HPLC, इलेक्ट्रोफोरेसिस र OPC द्वारा मागमा तयार गर्न सकिन्छ, हामी तपाईंलाई पनि प्रदान गर्न सक्छौं।शुद्धीकरण उपकरणपोस्ट-प्रोसेसिङको लागि।