ओलिगो शुद्धीकरणका लागि शुद्धीकरण उपकरण

1. जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस क्रोमैटोग्राफी शुद्धीकरण
शुद्धीकरणको लागि डिनेचरिंग पॉलीएक्रिलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसिस क्रोमेटोग्राफी प्रयोग गर्नुहोस्।डिनेचरिङ एजेन्ट सामान्यतया 4M फर्मामाइड वा 7M यूरिया हो, एक्रिलामाइडको एकाग्रता 5-15% बीचमा हुन्छ, र मेथाक्रिलामाइडको अनुपात मुख्यतया 2-10% बीचमा हुन्छ।
इलेक्ट्रोफोरेसिस पछि, पराबैंगनी प्रकाशको विकिरण अन्तर्गत न्यूक्लिक एसिड ब्यान्डको स्थिति निर्धारण गर्न आवश्यक छ, लक्ष्य न्यूक्लिक एसिड भएको जेल काटिएको छ, न्यूक्लिक एसिडलाई चकनाचुर पारिएको छ र लीच गरिएको छ, र त्यसपछि लीचिंग समाधान केन्द्रित, डिसल्ट गरिएको छ, परिमाणित र lyophilized।

2. DMT-अन, HPLC शुद्धीकरण
संश्लेषणको क्रममा DMT-On मोड छनोट गर्नुहोस्, कच्चा उत्पादन सेन्ट्रीफ्यूज गरिएको थियो र एमिनोलाइसिस पछि अतिरिक्त अमोनिया हटाउन कोठाको तापक्रममा केन्द्रित थियो।
पृथक्करण acetonitrile र 10% triethylamine-एसिटिक एसिड (TEAA) को रूपमा इल्युन्टको साथ C18 स्तम्भ प्रयोग गरेर प्रदर्शन गरिएको थियो।उत्सर्जन पूरा भएपछि, यसलाई केन्द्रित गरिन्छ, र त्यसपछि DMT समूहलाई ट्राइफ्लुरोएसेटिक एसिडले हटाइन्छ।तटस्थीकरण पछि, केही लवण र साना अणुहरू काटिएको ट्यूब मार्फत हटाइन्छ, र अन्तमा डिसल्ट गरिन्छ।

यो विधि उच्च शुद्धता संग उत्पादन प्राप्त गर्न सक्नुहुन्छ, तर यो depurination को घटना मा ध्यान दिन आवश्यक छ।

3. DMT-अफ, HPLC शुद्धीकरण
संश्लेषणको क्रममा DMT-Off छनोट गर्नुहोस्, र कच्चा उत्पादन अमोनोलाइसिस पछि अतिरिक्त अमोनिया हटाउन कोठाको तापक्रममा केन्द्रित र केन्द्रित गरिएको थियो।
पृथक्करण एसीटोनिट्रिलको साथ C18 स्तम्भ र 10% ट्राइथिलामाइन-एसिटिक एसिडलाई पानीमा एल्युएन्टको रूपमा प्रयोग गरी गरिएको थियो।पृथक्करण पूरा भएपछि र परिमाण निर्धारण गरेपछि, aliquots lyophilized छन्।

यस विधिलाई पृथक अवस्थाहरूको सावधानीपूर्वक समायोजन आवश्यक छ, र अपेक्षाकृत शुद्ध लक्ष्य अणुहरू पनि प्राप्त गर्न सकिन्छ।